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細(xì)胞培養(yǎng)之“黑膠蟲”的防治
發(fā)布時(shí)間: 2021-09-26 點(diǎn)擊次數(shù): 1921次“黑膠蟲"/“Nanobacteria"究竟是何方神圣?《生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展》雜志(PIBB)2020年第1期發(fā)表了題為細(xì)胞培養(yǎng)中“黑膠蟲"污染的檢測(cè)及防治一文。根據(jù)作者描述,“黑膠蟲"污染具有以下特征:
1. 培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基沒有區(qū)別;
2. 低倍鏡下它是黑色的點(diǎn)點(diǎn)和細(xì)胞碎片沒有區(qū)別
3. 高倍鏡下它會(huì)做運(yùn)動(dòng)給你看,也能模仿細(xì)胞碎片和細(xì)胞分泌物的布朗運(yùn)動(dòng)。還有黑膠蟲“路癡"到處跑的。
4. 與細(xì)胞的數(shù)量成反比,細(xì)胞越多,它越少,細(xì)胞越少它越多
5. 細(xì)胞狀態(tài)越養(yǎng)越差。
該科研成果除了得出這些結(jié)論外,還成功的鑒定出“黑膠蟲"為缺陷短波單胞菌屬新菌株,連名字都有了叫:Brevundimonas sp. GYBL3。
當(dāng)然也有實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示:初感染黑膠蟲對(duì)細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)都沒有影響,但是后續(xù)細(xì)胞生長(zhǎng)越來越慢,甚至停滯不長(zhǎng),黑點(diǎn)越來越多,直到細(xì)胞“全軍覆沒"。
黑膠蟲的防治:
1、盡量使用好的血清,但是好的血清一般價(jià)格高的離譜,經(jīng)濟(jì)條件不允許,也可以選用進(jìn)口新生牛血清代替。建議如果使用的是好的血清可不必滅活,這樣可以減少“小黑點(diǎn)"的形成。
2、如果是貼壁細(xì)胞的話,可用無菌的PBS洗幾次,可一定程度上緩解。若是懸浮的話,就不太好處理啦,可以向其中少加一點(diǎn)滋養(yǎng)細(xì)胞。加滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)有黑膠蟲的剛復(fù)蘇的細(xì)胞很有效!要是復(fù)蘇很久的細(xì)胞,那就用PBS反復(fù)離心幾次 ,一般建議是800-1000轉(zhuǎn)3分鐘, 離心2到3次,重新種植,加四環(huán)素等抗黑膠蟲的藥物進(jìn)行抑制,讓細(xì)胞盡快長(zhǎng)起來,黑膠蟲就消失了。
3、換用信得過的塑料培養(yǎng)瓶。
4、停止復(fù)蘇,停止養(yǎng)細(xì)胞,*消毒所有用于細(xì)胞培養(yǎng)的一切用品,包括所用的培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)基,吸管,胰酶,孵箱,超凈臺(tái)、空間等等你能想到的和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的所有物品,當(dāng)然也別忘了您的白大褂。
5、如果有其它可用的細(xì)胞,那么污染的細(xì)胞最好扔掉;如沒有,可試著用氯霉素 ,紅霉素,或四環(huán)素進(jìn)行抑制,或選用黑膠蟲抑制劑。
6、minocycline具有抑制的作用,可以在換液的時(shí)候使用。由于黑膠蟲尚未明確鑒定出是什么生物,所以上述的處理方法不一定正確,可以供考慮采用。
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