日韩精品一区二区三区日韩,99国产成人综合久久精品77

技術(shù)文章ARTICLE

您當(dāng)前的位置：首頁 > 技術(shù)文章 > 昆蟲細(xì)胞的擴(kuò)增

昆蟲細(xì)胞的擴(kuò)增

發(fā)布時間： 2022-12-07　　點擊次數(shù)： 1099次

原理
用機(jī)械法從細(xì)胞單層分離細(xì)胞，在 27°C 條件下和懸浮狀態(tài)下進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。
材料與儀器
Sf9細(xì)胞二甲基亞砜 Pluronic F68
生長培養(yǎng)液
培養(yǎng)瓶旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶和磁力攪拌器 27°C培養(yǎng)箱
步驟
常規(guī)維持培養(yǎng)

1. 通過刮取法或用培養(yǎng)液沖洗細(xì)胞（( ATCC # CRL-1711 ) 或從甘藍(lán)環(huán) Trichoplusia ni 獲得的細(xì)胞系（Tn 368 或 BTI-TN-5B1-4，也稱 “High Five "，可從 Invitrogen 購買））法使細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中脫落，或者利用在旋轉(zhuǎn)瓶中懸浮生長的細(xì)胞。

2. 用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)細(xì)胞，通過用臺盼藍(lán)或萘黑染色檢査細(xì)胞的活力。

3. 以 0.5~1×106 個/ml 活細(xì)胞密度將細(xì)胞種植于旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶內(nèi)，每 500 ml 旋轉(zhuǎn)瓶內(nèi)注入 20~100 ml 細(xì)胞懸液。

4. 在 20~28°C 條件下培養(yǎng)細(xì)胞，以 37°C 為佳。

5. 每 48~72 h 或當(dāng)細(xì)胞密度為 4~5×106 個/ml 時，將細(xì)胞稀釋至 0.5~1×106 個/ml。

6. 每 3~4 周將細(xì)胞移入潔凈的培養(yǎng)瓶。

7. 如果細(xì)胞群聚集，稍微加快攪拌速度，并加入表面活性劑 Pluronic F-68 [ 0.5%~1.0% (v / v ) ]，以降低剪切力。

凍存細(xì)胞

1. 計數(shù)細(xì)胞，離心（1000 rpm ，約 200 g，5 min )。

2. 用 10% DMSO ( 用 FBS 配制）混懸細(xì)胞，密度為 1×107 個/ml。

3. 將細(xì)胞分裝入凍存管，然后將凍存管放在冰上 1 h。

4. 將凍存管裝入苯乙烯泡沫容器。

5. 在 -70°C 條件下將凍存管緩慢冷凍過夜（約 1°C /min )。

6. 將凍存管移入液氮凍存器中。

7. 使凍存的細(xì)胞復(fù)蘇時，將凍存管在 37°C 迅速融化。如果細(xì)胞以液相儲存，在融化加蓋容器中的細(xì)胞時應(yīng)注意避免因凍存管破裂而導(dǎo)致受傷的危險。

8. 將細(xì)胞移入含 5 ml 培養(yǎng)液的 25 cm2 培養(yǎng)瓶。輕拍培養(yǎng)瓶，以便均勻地分散細(xì)胞。

9. 2~3 h 后吸去培養(yǎng)液。當(dāng)大多數(shù)細(xì)胞貼壁時，加入 5 ml 新鮮培養(yǎng)液。

10. 在分離前將細(xì)胞培養(yǎng) 2~3 天，使細(xì)胞恢復(fù)。然后按前述方法，將細(xì)胞移入攪拌培養(yǎng)瓶或更大的塑料瓶。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)

下一篇：冷胰蛋白酶解離組織

上一篇：結(jié)腸直腸腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)

產(chǎn)品中心 Products

午夜精彩视频在线观看免费视频,最新国产剧情无码AV网址,日韩欧美理论在线观看,久久噜噜噜精品国产亚洲综合

昆蟲細(xì)胞的擴(kuò)增

原理

材料與儀器

步驟