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活體動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑
更新時(shí)間：2024-06-26
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廠商性質(zhì)：代理商
生產(chǎn)地址：美國(guó)
in vivo Advanced活體動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑
描述
in vivo Advanced活體動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑可以通過靜脈注射或體內(nèi)局部組織注射的方式完成轉(zhuǎn)染過程。此外，轉(zhuǎn)染過程中總注射體積較小，致密組織可通過顯微注射來完成轉(zhuǎn)染，且轉(zhuǎn)染復(fù)合物在體內(nèi)循環(huán)時(shí)間較長(zhǎng)。DNA，siRNA及共轉(zhuǎn)染均可用此款轉(zhuǎn)染試劑來完成轉(zhuǎn)染操作。
基本條件
DNA
濃度: 300 ng/ul - 2 μg/ul;
溶劑: 質(zhì)粒DNA需溶于雙蒸水或超純水;
內(nèi)毒素: 去內(nèi)毒素
RNA
濃度: 20 μM, 40 μM, 60 μM, 80 μM
活體動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染操作步驟
轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備: 核酸和轉(zhuǎn)染試劑直接按照1:1混合。之后用移液器吹打混合溶液10-15次以充分混勻。將混合溶液于室溫環(huán)境中靜置10-15分鐘，轉(zhuǎn)染復(fù)合物即可制備結(jié)束。在復(fù)合物制備過程中，離心管的管壁要確保沒有液體殘留。
用注射器或顯微注射針完成靜脈注射或局部組織注射操作。
注射后3-5天，轉(zhuǎn)染效率可達(dá)到峰值，靶基因的表達(dá)量可于此時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。
活體動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染注射用量
動(dòng)物 | 注射方式 | 最大注射量(ul) | DNA用量(ug) | siRNA用量(ul) | 轉(zhuǎn)染試劑用量(ul) |
新生小鼠 | 腦室內(nèi)注射 | 2 | 1 | 1 | 1 |
裸鼠 | 尾靜脈注射 | 400 | 62 | 62 | 62 |
腫瘤內(nèi)注射 | 50 | 17 | 17 | 17 | |
成年小鼠 | 尾靜脈注射 | 400 | 62 | 62 | 62 |
腹腔內(nèi)注射 | 800 | 100 | 100 | 100 | |
腦室內(nèi)注射 | 5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | |
腫瘤內(nèi)注射 | 50 | 17 | 17 | 17 | |
成年大鼠 | 尾靜脈注射 | 2000 | 505 | 505 | 505 |
腦室內(nèi)注射 | 25 | 15 | 15 | 15 |
注意事項(xiàng)
DNA (μg) 或20 μM siRNA (μl)與轉(zhuǎn)染試劑的比例為1:1。
上表中siRNA的注射體積是針對(duì)20 μM siRNA的。如果siRNA的濃度為40 μM，則注射體積需減半；如果siRNA的濃度為80 μM，則注射體積需為表中體積的1/4；以此類推。
進(jìn)行局部組織注射實(shí)驗(yàn)時(shí)，轉(zhuǎn)染復(fù)合物的用量為5-10 μl/cm2。
進(jìn)行共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)時(shí)，核酸總用量應(yīng)和上表中用量一致，各種核酸用量的比例應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行調(diào)整。之后將各種核酸與轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行充分混合。
在具體實(shí)驗(yàn)操作過程中，核酸和轉(zhuǎn)染試劑的用量可根據(jù)上表中最大注射用量進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
訂貨信息
品名 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500025 | 0.25 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500050 | 0.50 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500075 | 0.75 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500150 | 1.50 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500500 | 5.00 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV501000 | 10.00 ml |
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